根据供体成纤维细胞的不同，重编程效率可能有所不同。优化条件可包括初始接种细胞数、LNP用 量、LNP添加次数、培养板包被基质和选择尝试不同的扩增因子(Y27632、CloneRTM2或CEPT混合物等）。

基于mRNA-LNP的人类成纤维细胞重编程时间表 (Version 1.0)

重编程时间表：

Day 0：将成纤维细胞接种至 LN521 包被的培养板中，用成纤维细胞培养基进行培养。 

Day 1-8：每天重复用含 B18R 蛋白的重编辑培养基替换每个孔中的培养基，同时向细胞培养物中加入 mRNA-LNP 试剂。 

Day 9-18：每天用 ReproTeSR 完全培养基（不含 B18R 重组蛋白）替换培养基，监测iPSC菌落形成情况。 

Day18-20：挑出 iPSC 单集落，并转移到新鲜的 LN521 包被的培养板中进行扩增。

重编程过程中的细胞形态：

重编程过程中成纤维细胞的形态变化和iPSCs的出现 (Version 1.0，红色箭头指示变形细胞）

干冰运输，避免反复冻融，-80℃保存1年，解冻后可4℃保存1~2周。

注意事项

1、为了您的安全，使用时请在洁净的实验室操作，穿戴好实验服及口罩等；

2、本产品仅限用于基础研究，不可用于包括人类体外诊断、治疗和用于人体在内的其他用途。 未经宜明生物的书面批准，不得将产品转让、转售、改造后转售、生产商业化产品，或者向其他第三方提供服务。