本方案提供标准操作参考，可根据具体实验条件进行调整。对起始细胞用量，LNP用量和孔板大小进行适当的成比例放大或缩小，以适配特殊的上下游实验方案。

基于RNA-LNP的PBMC重编程时间表，SFEB表示Serum-free Enhancer B

重编程时间表：

准备阶段

用Ubri-Amrita™PBMC完全培养基将细胞稀释后，接种到表面处理的孔板中并隔天补充。 

重编程阶段

DAY 0，将PBMC细胞接种至表面未处理的12孔板，并向细胞培养物中加入RNA-LNP试剂；

DAY 2，将细胞悬液转移到LN521包被的孔板中，并加入Ubri-Amrita™ iPSC重编程培养基和RNA-LNP试剂；

DAY 4 & DAY 6，重复用Ubri-Amrita™ iPSC重编程培养基替换每个孔中的培养基，同时向细胞培养物中加入RNA-LNP试剂；

DAY 8-16，每隔一天用2mL的Ubri-Amrita™ iPSC重编程培养基进行换液，并监测iPSCs克隆形成情况；

Day16-20，当iPSCs克隆足够大时，挑取单个iPSCs克隆。

重编程过程中的细胞形态：

 图像显示了重编程过程中PBMC的形态变化和iPSCs的出现。（红色箭头指示形变细胞）

干冰运输，避免反复冻融，-80℃保存1年，解冻后可4℃保存1~2周。

注意事项

1、为了您的安全，使用时请在洁净的实验室操作，穿戴好实验服及口罩等；

2、本产品仅限用于基础研究，不可用于包括人类体外诊断、治疗和用于人体在内的其他用途。 未经宜明生物的书面批准，不得将产品转让、转售、改造后转售、生产商业化产品，或者向其他第三方提供服务。